技術原理簡介

條件性過表達小(大)鼠的構建主要是通過Cre/LoxP重組系統(tǒng)來實現(xiàn)的。該系統(tǒng)是位點特異性重組酶系統(tǒng)，已發(fā)展成為在體內(nèi)、外進行遺傳操作的有力工具。其可以使靶基因的表達或缺失發(fā)生在試驗動物發(fā)育的某一階段或某一特定的組織器官。此外，若與控制Cre表達的其他誘導系統(tǒng)相結合，還可以對某一基因同時實現(xiàn)時空兩方面的調控。通過構建帶有廣泛表達啟動子-LoxP-Stop-LoxP-目的基因的條件性調控表達框架，通過顯微注射制備在特定位點，如Rosa26, H11等位點，帶有條件性調控表達框架的敲入小(大)鼠模型，轉基因在正常情況下并不表達，只有與相應的組織特異性表達的Cre/CreERT2小鼠雜交后，因Stop終止序列在特定的組織中被去除，從而達到轉基因在誘導性/特定組織中特異性表達的目的。

Rosa26或H11位點的優(yōu)勢

表達Pattern穩(wěn)定: 定點敲入構建過表達，不像隨機插入基因組的轉基因，表達特異性和表達量（expression pattern）穩(wěn)定
表達Pattern不受上下游DNA元件影響： Rosa26 or Hipp11(H11)無影響基因特異表達的調控元件，不會影響敲入的啟動子的表達Pattern

TALEN/CRISPR構建條件性敲除小(大)鼠技術流程圖

服務流程及周期

服務流程及周期圖